Co je endotoxinový test?

Co je endotoxinový test?

Endotoxiny jsou hydrofobní molekuly, které jsou součástí lipopolysacharidového komplexu, který tvoří většinu vnější membrány gramnegativních bakterií.Uvolňují se, když bakterie zemřou a jejich vnější membrány se rozpadnou.Endotoxiny jsou považovány za hlavní přispěvatele k pyrogenní reakci.A parenterální produkty kontaminované pyrogeny mohou u lidí vést k rozvoji horečky, indukci zánětlivé reakce, šoku, selhání orgánů a smrti.

Endotoxinový test je test k detekci nebo kvantifikaci endotoxinů z gramnegativních bakterií.

K detekci a kvantifikaci endotoxinů ve farmaceutických produktech se nejprve používají králíci.Podle USP zahrnuje RPT monitorování zvýšení teploty nebo horečky po intravenózní injekci léčiva králíkům.A 21 CFR 610.13(b) vyžaduje králičí pyrogenní test pro specifické biologické produkty.

V 60. letech 20. století Fredrick Bang a Jack Levin zjistili, že amebocyty kraba podkovy se budou srážet v přítomnosti endotoxinů.TheLimulus ambocytový lyzát(nebo Tachypleus Amebocyte Lysate) byl vyvinut odpovídajícím způsobem, aby nahradil většinu RPT.Na USP je LAL test označován jako bakteriální endotoxinový test (BET).A BET lze provést pomocí 3 technik: 1) techniky gel-clot;2) turbidimetrická technika;3) chromogenní technika.Požadavky na LAL test obsahují optimální pH, iontovou sílu, teplotu a dobu inkubace.

Ve srovnání s RPT je BET rychlý a efektivní.BET však nemohl nahradit RPT úplně.Protože stanovení LAL může být ovlivněno faktory a není schopné detekovat neendotoxinové pyrogeny.