Aplikace chromogenní techniky na test bakteriálních endotoxinů

Chromogenní technika patří mezi tři techniky, které také obsahují techniku ​​gelové sraženiny a turbidimetrickou techniku ​​k detekci nebo kvantifikaci endotoxinů z gramnegativních bakterií pomocí amoebocytového lyzátu extrahovaného z modré krve krabů vrápovitých (Limulus polyphemus nebo Tachypleus tridentatus).Může být klasifikován jako endpoint-chromogenní test nebo kineticko-chromogenní test založený na konkrétním použitém principu testu.

Princip reakce spočívá v tom, že: lyzát amebocytů obsahuje kaskádu enzymů serinových proteáz (proenzymů), které mohou být aktivovány bakteriálními endotoxiny.Endotoxiny aktivují proenzymy k produkci aktivovaných enzymů (nazývaných koaguláza), koaguláza katalyzuje štěpení bezbarvého substrátu a uvolňuje žlutě zbarvený produkt pNA.Uvolněný pNA lze měřit fotometricky při 405 nm.A absorbance pozitivně koreluje s koncentrací endotoxinu, potom lze koncentraci endotoxinu odpovídajícím způsobem kvantifikovat.


Čas odeslání: 29. září 2019